<delect id="4wyuo"></delect>
  • <strike id="4wyuo"><acronym id="4wyuo"></acronym></strike>
    <li id="4wyuo"></li>
    <button id="4wyuo"><input id="4wyuo"></input></button>
  • <li id="4wyuo"></li>
  • <table id="4wyuo"></table>
    上海喆圖科學儀器

    Zhetu Scientific Instrument

    服務熱線:400-001-0304

    技術文章

    ARTICLE

    當前位置:首頁技術文章用生化培養箱做免疫熒光實驗

    用生化培養箱做免疫熒光實驗

    更新時間:2024-03-19點擊次數:971

    生化培養箱做免疫熒光實驗的流程如下:

    1、細胞準備

    (1)取出生長狀態良好的細胞,棄培養基,消化重懸細胞。
    (2)將24孔圓形爬片放入24孔板的孔中。
    (3)根據細胞生長特性取適量細胞于已鋪爬片的24孔板中,放入37℃生化培養箱培養。
    2、固定
    (1)取出細胞,棄去培養基,用PBS洗細胞3次。
    (2)每孔加入1mL的4%多聚甲醛,室溫固定10-20min,棄去多聚甲醛;
    (3)加入1mL的PBS清洗細胞,重復兩次。
    3、通透
    (1)每孔加入1mL的0.5% Triton-X100 ,室溫10min,棄去Triton-X100。
    (2)加入1mL的PBS清洗細胞,5min,棄PBS。重復兩次。
    4、封閉
    每孔中加入1mL的3%BSA封閉液,室溫封閉1h。棄封閉液。
    5、一抗結合
    (1)向爬片上滴加稀釋好的一抗,用錫箔紙包住24孔板外面,輕柔的將24 孔板放置于4℃生化培養箱中,過夜孵育。
    (2)加入1mL的PBS清洗細胞,5min,棄PBS。重復五次。
    6、二抗結合
    (1)加封閉液稀釋的二抗室溫避光孵育1h。
    (2)加入1mL的PBS清洗細胞,5min,棄PBS。重復五次。
    7、DAPI染色
    (1)按照1:4000比例用1×PBS稀釋DAPI工作液(參照廠家說明書),并向每個孔中加入1mL的DAPI工作液,避光靜置染色10min。
    (2)加入1mL的PBS清洗細胞,5min,棄PBS。重復三次。
    8、封片及檢測
    (1)將爬片小心取出,用吸水紙吸干多余液體,加5μl的抗熒光淬滅劑到載玻片上。
    (2)將爬片倒置載玻片上,周圍涂指甲油固定。

    (3)4℃生化培養箱暫存或直接激光共聚焦顯微鏡拍攝。

    638464651535996615730.jpg



    返回列表
    • 服務熱線 400-001-0304
    • 電子郵箱

      zhushumin@zhetu.com

    掃碼加微信

    Copyright © 2025 上海喆圖科學儀器有限公司版權所有    備案號:滬ICP備14016230號-3

    技術支持:化工儀器網    sitemap.xml

    主站蜘蛛池模板: 集安市| 平乐县| 抚顺县| 东明县| 北川| 萨迦县| 乌鲁木齐市| 抚远县| 石首市| 天祝| 萝北县| 漠河县| 图木舒克市| 玉环县| 谢通门县| 万安县| 平阳县| 兰溪市| 大理市| 沂源县| 泸州市| 桦川县| 凤山市| 区。| 通州区| 贡觉县| 家居| 临泽县| 延川县| 福泉市| 通州区| 三原县| 曲沃县| 醴陵市| 滁州市| 长治市| 廉江市| 泾川县| 屏南县| 太湖县| 娱乐|