細胞培養箱的清潔和消毒

1.   培養箱消毒：先用純水擦洗，再用95的酒精擦洗，再照紫外就可以拉！注意周圍環境的清潔就不會那么容易污染的拉！

2.   我的經驗是在補充水時把水加熱一下，達到培養箱的溫度。

3.   這么早就養細胞了，我們這里一般是用70％的乙醇擦洗，然后再用0.1％的新潔爾滅擦洗，不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1：1比例熏一遍。注意要是熏的話千萬注意混合之后馬上離開，然后密閉細胞培養室，味道很刺激的。在養細胞前消毒，否則，確實沒地方放細胞。

4.   我們的方法比較簡單，先用75%酒精擦拭內壁，通風10分鐘，紫外線照射30分鐘即可。

5.   我們的通常處理是先用75%的酒精擦拭內壁，然后用甲醛+高錳酸鉀熏蒸一個晚上，然后通風一整天（同時打開紫外線照射）。

6.   我們是把培養箱里的板層拿出來高壓一下，箱壁用75％酒精擦一遍，換用詩樂氏擦一遍，再紫外照一夜，效果很好，其他的請高手指教。

7.   熏蒸后吹一天是不夠的，zui起碼要一個星期才可以讓甲醛散盡，要不細胞長不好的

8.   有的培養箱能加熱內壁到90度，也有的帶有紫外線功能。常規應該每周用酒精擦洗內部一次。具體的操作請參考培養箱的手冊，或著咨詢培養箱。使用消毒劑應小心，培養箱內有檢測溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器，腐蝕性消毒劑或有機溶劑有可能損壞某些器件，請慎用。另外，揮發性的甲醛有毒，易燃、易爆。如果在培養箱內殘留甲醛的話，細胞會死光光哦（我實驗室的真實故事）。總之，先看培養箱手冊，再，方可*啊。

9.   常規什么也不放！硫酸銅的作用是抑制細菌生長（但多數用在處理污染的孔板）。因為現在的孵箱都有抑菌功能。

10.   我們實驗室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺內加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關系.細胞養的都可以.

11.   我建議

1 先把培養箱*消毒.具體方法也是用75%的酒精好好清洗培養箱.

2,操作時嚴格按照無菌操作的原則

3 我認為雙抗的更換問題倒是不大,除非你正在使用的是污染的抗生素.

4 盡量減少觀看細胞的次數及時間.

12.   我們實驗室清潔培養箱的方法：用洗衣粉或洗潔精洗一遍——清水沖凈——84消毒液洗——清水沖凈——75％酒精擦洗一遍

13.   這是我們實驗室常規的培養箱消毒方法（一般一個月一次），希望對你會有用

14.   首先把培養箱里的東西全部取出，放盡培養箱里的三蒸水；反復用三蒸水沖洗培養箱，然后用75%酒精擦3遍，之后再用三蒸水擦3遍；培養箱里的架子先用自來水反復沖洗，然后用蒸餾水、三蒸水、75%酒精各擦3次，于紫外下照射消毒1 h左右；zui后將三蒸水（里面應加少許染料）加入培養箱，將消毒好的架子放入即

15.   培養箱應放置無菌室,水中應加適量的疊氮鈉(防腐)或者硫酸銅,注意空氣消毒.

16.   消毒培養箱的常用方法有兩種：

把細胞移出，記住擰緊瓶蓋，通常放在超凈臺內，室溫一兩個小時，問題不大。如培養室有空調，也可將空調打開。然后先用75%酒精棉球擦拭培養箱內壁，注意不要漏掉任何一個角落。擦拭兩遍后用一蒸水或二蒸水清洗內壁，可多清洗幾遍。zui后用消過毒的棉球或75%酒精棉球把內壁再擦拭一遍即可。整個操作沒有必要在無菌條件下。zui后可在培養箱的水里加上亞甲基藍，混勻即可。亞甲基藍溶液可起到一定的抑菌殺菌作用。待培養箱內酒精幾乎揮發完時，將細胞放入培養箱中。

還有一種辦法就是直接用蒸餾水清洗完，然后再用紫外燈照(是那種培養箱里就帶有紫外燈的，就方便多了。)

通常培養箱是需要定期清洗的，我們室是1-2月清洗一次，當然這要根據細胞養的多少和培養箱使用的頻繁程度來決定的。

17.   我們實驗室液發生過類似事件，我把我們處理過程告訴你，希望對你有幫助：

首先消毒培養箱，如果你們有兩個或以上培養箱就好辦了，如果只有一個且還有很多其他細胞就麻煩點。只能暫時的放在超凈臺上。具體如下，中午將空調溫度打到zui高（也只有31度），超凈臺開紫外。下午早點來關紫外，將細胞培養瓶蓋蓋緊，轉到超凈臺內，用75％酒精擦洗培養箱，再用無臭氧型可移動的紫外等照射半小時，然后將細胞放回，松開蓋口即可（切記CO2瓶子閥門要關緊啊，不然氣全跑光了）。

一般實驗室長了霉菌的話，肯定要全部消毒。

再消毒實驗室，先把室內空調和消毒柜過濾網都拆下清洗，在錐形瓶內加點高錳酸鉀，放在實驗室地上，然后倒入甲醛，立馬關門走人就可以了。

2天后再開門裝好東西，和往常一樣開始工作了。由于2天不能做事，個人細胞要先計劃好，大家都可以休息兩天。

18.   我們實驗室是將細胞全部取出，酒精擦洗培養相，然后用紫外線照射4小時以上，污染細胞全部丟掉。還有就是培養室也采用紫外線消毒

19.   我也碰過這個情況，是自己的基礎培養基污染了，光鏡下面可以看見瓶底有細細的黑色小顆粒，但具體原因不詳。處理方法：

1、被污染的細胞全部照過紫外線2小時以上后扔掉；

2、同一批的培養基、使用的細胞清洗液等等全部重新濾過消毒（有點舍不得全部扔掉，就嘗試了一下，結果證明是可以的）；

3、打開培養箱，用75%酒精擦洗，然后用新潔爾滅擦洗（此步驟我們重復了2次，隔天），用紫外照射4小時以上；

4、清掃培養室，紫外照4小時以上，重復一次；

后來就沒有啦。：）如果污染嚴重的話，那就要重復重復再重復了。

20.   偶也在年前遇到兩次大爆發，先是真菌后是細菌。搞得我對細胞培養都快失去信心了，我養細胞都一年半了，平時細胞沒什么，感覺養細胞是很簡單的事，可是當污染大爆發時真的有招架不住的感覺。記得當時丟掉了幾乎所有的細胞，近一百瓶，就只剩下保種的三兩瓶，寒！！！至于處理方法，也就是乳酸熏蒸（記得把培養箱及超凈臺打開）之后一周關門關窗，不再進培養室，一周后75%酒精做*滅菌，也就是用酒精搽培養箱及培養室里的所有平面，甚至包括地面。到現在有四個月了，偶的細胞一直很好。建議不要驚慌，所謂兵來將擋，水來土掩。呵呵呵，一切會好起來的。

21.   看來你要大動干戈了。首先考慮培養基的問題。可以單獨放置一瓶培養基到其他的培養箱里培養24小時看看是不是培養基污染。不過建議還是全部扔掉重新配置比較好。其次考慮培養箱和培養室的問題。基本上應該每一個月將培養箱*消毒一次的。首先用75％酒精擦洗，一般的培養箱都是可以拆卸的，將能拆卸的部分拆開擦洗后放到烤箱里烘烤（180度5個小時）。剩下的培養箱里用戊二醛擦洗后用紫外燈反復照射。然后在要用培養箱培養室之前再用紫外燈照射消毒2小時。你的照片里顯示的應該是細菌污染，咳比較好對付。

22.   設置5％，卻顯示5.1％（當然這點差距實在不算太大，至于顯示HIGH CO2，那是可以自己設定的，你可以自己設定二氧化碳濃度達到多少時報警（也即顯示HIGH CO2，同時可能發出警鳴音，如果你沒有按MUTE按鈕或同等設置），同樣地，你可以設置下限，還有溫度的上下限），培養箱溫度升高時CO2濃度會增加，反之亦然。檢查一下你的CO2減壓閥上面顯示的壓力指示是否超過0.08MPa，長期過高的CO2壓力容易損壞培養箱內CO2壓力調節模塊，那樣需要很多銀子修理的。如果情況進一步惡化，建議售后服務。

23.   手提式紫外燈

24.   1）一個大原則是：細菌和細胞體系是*不同的，絕不可以放在一起，一般實驗室均設置細菌間、細胞間，嚴格的分開是成功培養細胞的保證。

2）關于CO2培養箱的清潔工作，應該說不難。由于為不銹鋼材，你用0.1%新潔爾滅擦洗干凈后，在用2%的CuSO4清洗（清霉菌，在CO2條件下霉菌很易生/），用70%乙醇噴霧消毒箱內空氣。再涼干后，再底部再加2%CuSO4（水稍出現蘭色即可）的滅菌水進行穩定培養箱，待培養箱溫度和濕度穩定后，再用一瓶細胞預實驗一下，培養2-3天，沒有問題再進行培養。

25.   有的培養箱可以直接高溫干烤滅菌的，或者有的金屬架可以干烤

26.   底部水盤加入蒸餾水后見到一片一片的東西，很可能是細菌群落的生長！個人經驗是，必須清洗，而且是*清洗干凈！拆開支架和每層的托盤，包括水盤（注意拆卸先向技術員了解內部結構，以防誤拆損壞），用碘伏棉球將培養箱里里外外和拆出來的部件拭擦2次，然后再用酒精將殘留碘伏拭去。下一步是，打開培養箱的門，開紫外照射一晚，這樣就可放心了。我剛回來就是如此弄的，培養的細胞并沒有感染跡象，活力甚佳，供參考！祝你好運！

27.   我使用的方法是：

1 取下培養箱內的隔板及掛鉤，用清水清洗干凈后，75%酒精*擦洗消毒，然后120度烤箱，考1小時。

2，培養箱用清水擦洗干凈后用75%酒精*擦洗消毒

3，帶無菌手套，安裝好培養箱內的隔板及掛鉤

4，打開培養箱紫外燈照射30分鐘

5，高壓蒸餾水后加入

我們一直就是這樣做的，效果很好，可以試試看啊。

28.   補充一個水盤消毒的法子∶清水清洗干凈，75%酒精*擦洗消毒后，多弄些酒精上去，點火燒一下．效果杠杠的！！

29.   把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺內加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關系

30.   水套式，氣套式二氧化碳培養箱。

31.   細胞生長的環境要求有一定濕度，必須加水！我的小經驗是： 1、雙蒸水裝在5L瓶中，2、高溫滅菌，3、移進細胞培養實驗室，在紫外照射下冷卻，4、6小時后，在加入培養箱中使用。

如果發現托盤中的說有白色漂浮物存在是，盡量吸干！（此物考慮是霉菌污染）;

還有如果有條件，就是定期75％酒精大清潔！我一般2個月清潔一次！（包括細胞培養實驗室）

這樣在無菌操作下，基本保證你免除污染！！

32.   培養箱內不加水是不正規的，因為細胞生長的環境要求有一定濕度。

我們培養細胞不僅經常保持有水，而且培養液中不加任何抗生素。只要無菌操作過關，不會發生細菌污染。

33.   我們實驗室平常培養箱的消毒方法：（清潔前開紫外30分鐘）

1、隔板的清潔：先將隔板卸下，用干凈紗布沾新潔而滅擦兩遍；

2、箱內壁用新潔而滅擦拭后再噴75％酒精，關門熏蒸15分鐘；

3、盛蒸餾水的盤子：把盤里的水倒掉，用新潔而滅擦拭，干后倒入三蒸水；

4、裝好板后，再噴75％酒精關門熏蒸30分鐘。

5、培養室開紫外照30分鐘以上。

34.   我們實驗室是將全部隔板卸下，新潔而滅擦拭，放在超凈工作臺內紫外殺菌，CO2孵箱內用紫外燈照射12h以上。

35.   推薦方法：拆卸隔板，新潔兒滅搽3次，然后酒精搽3次，紫外下面照2小時，然后裝上隔板，箱壁同樣處理，打開箱子，用小紫外燈或房間紫外燈照2小時。注意要搽頂部的螺旋槳。裝好后，噴酒精即可。另外，還是用用硫酸銅比較好，飽和溶液放置在箱子底部。屢試屢爽，大約可以管3-4個月沒有問題。如有效，請斑竹加分，謝謝！

36.   加硫酸銅的目的是為了防止真菌的生長,但硫酸銅容易改變孵箱pH值,所以建議不加硫酸銅,直接加蒸餾水即可,保持孵箱濕度.

37.   前一段時間培養箱里老是有散在的細胞霉菌污染。培養箱高溫消毒后，現在打開，發現里面那扇玻璃門和墊圈會有大量水汽，培養瓶外壁也有。請問是怎么回事？細胞還能養嗎？是因為培養箱門的加熱故障或設置錯誤，導致門的溫度與箱內溫度不一樣，所以引起玻璃門結水汽。對細胞培養沒多大的影響，因為箱內的溫度是正常的。

38.   這種情況很常見，可以用以下方法解決：往水盤里的水加入適量的硫酸銅，攪拌均勻即可，因為硫酸銅是重金屬鹽，可以達到殺菌效果；另外也可以加10％的新吉爾滅等無刺激性的消毒物質。注意，千萬不能直接往水盤里加自來水，因為自來水里有很多潛在的霉菌等，一旦條件溫和它們就會迅速繁殖，是用煮開的蒸餾水。注意了這些細節，問題就迎刃而解了